1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

  3. 浓度为 0 的品可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍，终结果乘以5才是样本终浓度。

  7. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

  8. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

  操作步骤 1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。 2. 设置品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；品孔各加不同浓度的品 50μL； 3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL； 4. 随后品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 5. 弃去，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗 板 5 次（也可用洗板机洗板）。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 结果判断 绘制曲线：在Excel工作表中，以品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

  试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。 严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

  洗板：手工洗板：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此数次。 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验中。