本试剂盒选用双夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被捕获的包被微孔中，顺次参加标本、品、HRP符号的检测，通过温育并洗刷。

  1. 试剂盒保存在 2-8℃，运用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗刷液会有结晶，这归于正常现象，水浴加热使结晶彻底溶解后再运用。

  3. 浓度为 0 的品可视为阴性对照或许空白；依照说明书操作时样本现已稀释 5 倍，终成果乘以5才是样本终浓度。

  7. 20×洗刷缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗刷缓冲液加 19 份的蒸馏水。

  8. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

  操作过程 1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩下板条用自封袋密封放回 4℃。 2. 设置品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；品孔各加不同浓度的品 50μL； 3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL； 4. 随后品孔和样本孔中（空白孔不加）参加辣根过氧化物酶（HRP）符号的检测 50μL，用封板膜封住反响孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 5. 弃去，吸水纸上拍干，每孔加满洗刷液，静置 1min，甩去洗刷液，吸水纸上拍干，如此重复洗 板 5 次（也可用洗板机洗板）。 6. 全部孔参加底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。 7. 全部孔参加停止液 50μL，15min 内，在 450nm 波利益测定各孔的 OD 值。 成果判别 制作曲线：在Excel作业表中，以品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，制作出品线性回归曲线，按曲线方程核算各样本浓度值。

  试剂盒仅供研讨运用，不得用于临床试验或生物体试验，不然所发生的全部结果，由试验者承当， 本公司概不负责。 严厉依照说明书操作，不同批号不行交流运用，试验者违背说明书操作，结果由试验者承当。

  布ELISA：（C－ELISA）C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年树立的一种新式检测技能。该是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即涤纶布为固相载体，这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大，可为反响供给较大的表面积，反响的性，且简单洗刷，不需特别仪器等长处。其根底原理与Dot-ELISA相似，仅仅载体不同。以对布氏杆菌抗原的检测为例，C－ELISA的首要程序为：⑴ 把抗布氏杆菌的包被（吸附）在聚脂布上，并经洗刷及关闭；⑵ 加被检样品并于室温下感作30分钟，然后洗5次；⑶ 加酶符号的抗布氏杆菌，于室温下感作30分钟，然后洗刷5次；⑷ 参加底物液显色；⑸ 测定OD值。

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