糖类抗原(CA)19-9是消化系统肿瘤标志物之一，患胰腺癌、胃癌、肝癌及结直肠癌等各种消化系统恶性肿瘤患者血清中会分泌大量的CA19-9，健康人的胰腺、胆管等部位也会分泌少量的CA19-9。众所周知，CA19-9在消化道肿瘤的诊断、治疗、疾病进展监测、预后判断方面有较大的临床应用价值。

  目前，CA19-9常用的检测的新方法为电化学发光免疫分析法，检测原理是基于抗原与抗体的反应，该法具有灵敏度较高和特异性强的特点,且通量较大，适合大样本量的检测，但检测结果受到各种内外源物质的干扰，因此导致检测结果的假性升高或降低。

  本研究案例，CA19-9异常升高，其余肿瘤标志物正常，与其他辅助检测结果和临床体征不相符，我们通过对标本的处理和结果的分析，得出CA19-9异常升高的原因，并进行报道。

  患者，男，29岁，来我院例行健康体检，既往“新冠病毒感染病史”。检验测试的项目中血清CA19-9水平非常明显升高，其余肿瘤标志物正常（如图1）。辅助检查肝胆胰脾肾彩超无明显异常；甲状腺彩超示实质回声不均匀，甲状腺左侧叶结节；胸部CT平扫未见明显实质性病变；腹部平扫CT无明显异常；心电图示窦性心动过缓伴不齐；血液检查丙氨酸氨基转移酶（ALT）：58.4U/L，其余肝肾功能、血脂、血常规、血糖未见明显异常。

  CA19-9与辅助检查结果和临床体征不符。首先我们查看当日质控在控，标本复测（CA19-9：729.3U/mL）排除随机误差，推测该患者体内存在某种干扰物质，导致CA19-9检测的假性升高。于是翻阅试剂说明书，进行干扰物质的确认（表1）。

  翻阅试剂说明书，确认无果。联系试剂厂家，进行仔细的检测结果处理分析的沟通。最终，我们采用梯度实验（图2）和聚乙二醇（PEG）沉淀实验（表2），并联系兄弟医院更换检验测试平台（表2），继续干扰物质的排查确认。

  一：梯度实验：采用生理盐水进行倍比稀释，将稀释后的检测结果与理论值做线，提示梯度稀释结果与理论值不存在线性关系，标本中存在干扰物质导致检测结果的假性升高。

  二：PEG沉淀实验：配置25% PEG6000溶液，将血清样本和PEG溶液按1∶1的比例混合，检测结果乘2为最终结果。回收率（%）=（PEG处理后的检测值×2/PEG处理前的检测值）×100=8.3%，回收率40%，说明存在大分子蛋白质干扰。

  三：更换检测系统：本院检测平台为电化学发光法，原理为双抗体夹心法；兄弟医院检测平台为化学发光法，原理为二步夹心法，偏差(%)=(兄弟医院结果-本院结果)/本院结果×100%=-97.01%，二者有显著差异。

  综上，我们验证了CA19-9的异常升高是由异嗜性抗体或其他自身抗体等蛋白质分子干扰导致的。最终，我们发出了兄弟医院的检测结果，CA19-9：22.4U/mL。

  众所周知，影响检测结果准确性的因素包括人、机、料、法、环，其中检测的新方法是重要的因素之一。目前，CA19-9的主流检测的新方法为电化学发光免疫分析法，其核心原理是抗原抗体复合物的形成，反应的特异性与试剂盒中抗体的特性密切相关。

  本案例患者，血清CA19-9水平异常升高与临床症状和体征严重不符,我们推测该患者体内存在某种干扰物质,结合了试剂盒中的抗体成分，导致CA19-9水平的假性升高,为此咱们进行确认试验。

  首先根据试剂说明书对于检测局限性的描述，排除了胆红素、血红蛋白、类风湿因子和脂肪乳剂的干扰；其次进行梯度实验和PEG沉淀实验，做线性回归分析和计算回收率，验证了大分子蛋白质物质影响检测结果的假象；最后更换检测平台进一步求证，检测结果的差异显著说明血清CA19-9水平的异常升高是受到了异嗜性抗体或其他自身抗体等蛋白质分子的严重干扰。

  自身抗体、人抗动物抗体、异嗜性抗体等会影响多种免疫检测的新方法，涉及多种检验测试的项目，如促肾上腺皮质激素[1]、游离前列腺特异抗原[2]、甲状腺激素[3]等。

  黎锦等[4]阐述了异嗜性抗体、人抗动物抗体和自身抗体等对免疫检验测试的项目的干扰机制，即干扰物质可能桥接捕获抗体和标记抗体，导致结果假性升高；也可能阻碍样本中抗原和检测抗体结合，因此导致结果假性降低。

  另有研究表明异嗜性抗体干扰机制可能是异嗜性抗体与检测试剂抗体的Fc表位或Fab区域中的决定簇结合,干扰夹心法和竞争法的免疫检测[5]。总之，这些干扰物质会导致检测结果假性升高或降低，给临床诊疗带来误诊或漏诊。

  目前,大多数试剂盒说明书对检测验证的方法的局限性进行了说明,但也未能全部描述干扰物质的种类。类似的处理分析方法，除了本文的梯度法和PEG法外,还有蛋白G法、异嗜性抗体阻断剂（HBT）法、热和酸处理法,每种方法各有其优缺点,消除效果取决于免疫分析原理及标本中干扰物质的成分。本案例中，血清CA19-9的报告,不同的结果会有截然不同的临床反馈,因此,对于异常检验结果应谨慎处理。

  不同的检验测试平台，试剂包被的抗原或抗点不同,相同项目的检测结果有一定差别。检验工作者应当充分掌握检测系统中有几率存在的干扰因素，了解必要的临床专业相关知识。在发现不合理的检测结果时，如检测结果存在矛盾、检测结果与临床症状不符、本次结果与历史结果差距较大、接受过动物免疫制剂治疗或服用特殊药物等导致结果难以解释的，可采用PEG沉淀法或HBT法对样本做处理，消除或降低干扰因素的影响，也能够准确的通过实验室条件采用不一样的检验测试平台，为临床提供准确、可靠的检测结果，为患者交出一份较为满意合理的答案。

  [1]张小云，李娜，张少玲，等.一例促肾上腺皮质激素异常升高的案例分析[J].中华临床实验室管理电子杂志，2018，6（3）：190-192.

  [3]邢淑清，艾合买提江·吐乎提，魏子祥，等.异嗜性抗体干扰甲状腺激素检测结果的临床病例分析[J].国际检验医学杂志，2020，41（4）：478-480.

  [4]黎锦，李一荣.内源性抗体对临床免疫检测的干扰及对策[J].中华检验医学杂志，2016，39（11）：811-813.